期刊简介

本杂志由广东省口腔医院、广东省牙病防治指导组主办,是国家科委批准公开发行的学术期刊。本刊有下列专栏:论著及应用研究,预防与社会医学,防治实践,新技术应用,口腔护理,临床报告,专题论述,综述,讲座等。对迅速反映牙病防治新技术、新方法、新材料的稿件最为欢迎,并优先安排审稿和发稿,对本刊长期订户的来稿,亦优先安排审稿和发稿。                

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  • 杂志名称:口腔疾病防治杂志
  • 主管单位:广东省卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:广东省口腔医院,广东省牙病防治指导中心
  • 国际刊号:1006-5245
  • 国内刊号:44-1407/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录:万方收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中)
口腔疾病防治杂志2010年第01期

SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-EGFP重组沙门菌的构建及在B16细胞中的表达

曾曙光;彭细毛;栾修文;章锦才;张积仁;艾伟健;徐平平;刘曙光

关键词:基因疫苗载体, 热休克蛋白70, 沙门菌属, 黑色素瘤B16细胞
摘要:目的 构建能够稳定表达结核杆菌热休克蛋白70(mycobacterium tuberculosis heat shock protein 70,mtHSP70)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)双基因的鼠减毒伤寒沙门菌真核共表达载体,探讨其在小鼠黑色素瘤B16肿瘤细胞中的表达.方法 将重组质粒PCMV- mtHSP70-IRES-EGFP电穿孔转入减毒沙门氏菌SL7207中,酶切鉴定,并对构建的重组减毒沙门氏菌体外连续传代20代后再酶切鉴定,对其稳定性进行观察;重组菌体外感染B16,荧光显微镜下观察B16细胞荧光表达及蛋白印迹法(Western blot)检测重组菌在B16细胞内mtHSP70蛋白的表达.结果 PCMV-mtHSP70-IRES-EGFP成功导入减毒沙门氏菌SL7207中;该重组菌株在体外能稳定地繁殖、生长和传代;重组菌体外感染B16约36 h后,B16细胞胞体变圆并高效表达强荧光,重组菌在B16细胞内表达mtHSP70蛋白.结论 成功构建能在真核细胞中稳定表达mtHSP70与EGFP双基因的重组减毒沙门氏菌株,为恶性黑色素瘤靶向基因免疫治疗的后续研究奠定了基础.